南京医科大学学报(自然科学版)

作者：蒋秀琴,许金金,郭文文,郑大同,胡圳圳

单位：南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心，江苏 南京 210003,,南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心，江苏 南京 210003,,南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心，江苏 南京 210003,,南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心，江苏 南京 210003,,南京医科大学第二附属医院临床分子基因检测中心，江苏 南京 210003,

关键词：Max二聚化蛋白1;胃癌;细胞增殖;细胞迁移

基金：国家自然科学基金（81301822）；南京医科大学科技发展基金重点资助项目（2012NJMU088）

目的：构建Max二聚化蛋白1（Max dimerization protein 1，Mad1）的真核表达载体，研究Mad1对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法：利用DNA重组技术将Mad1基因克隆至pEGFP-N1载体，构建重组真核表达载体pEGFP-N1-Mad1。经酶切和测序鉴定后，采用脂质体转染技术将重组质粒瞬时转染人胃癌AGS细胞，RT-PCR及Western blot检测Mad1基因和蛋白的表达。荧光显微镜观察Mad1在AGS细胞内的定位情况。CCK-8和Transwell实验研究Mad1对胃癌AGS细胞增殖和迁移能力的影响。结果：成功构建携带Mad1基因的真核表达载体pEGFP-N1-Mad1。将重组质粒瞬时转染AGS细胞后，RT-PCR和Western blot检测到Mad1 基因和蛋白的表达。Mad1基因表达产物定位于AGS细胞核中。CCK-8和Transwell实验结果显示，转染Mad1的AGS细胞与转染空载体的AGS细胞及正常AGS细胞相比，细胞增殖活力和迁移能力明显降低。结论：成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-Mad1，研究表明Mad1可以抑制胃癌AGS细胞的增殖和迁移。

来源：2019年第1期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

查看南京医科大学学报(自然科学版)杂志2019年第1期