南京医科大学学报(自然科学版)

作者：许秀华,郑 峰,岳 岩,汪春晖,周婷婷,胡龙华

单位：南昌大学第二附属医院检验科，江西医学检验重点实验室，江西 南昌 330036；2东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,解放军总医院眼科，北京 100853,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,南昌大学第二附属医院检验科，江西医学检验重点实验室，江西 南昌 330036,

关键词：金黄色葡萄球菌;富丝氨酸重复蛋白;单克隆抗体;巨噬细胞;免疫复合物

基金：国家科技重大专项（2017ZX10303401）；国家自然科学基金（81460327）；江苏省博士后基金（1701155C）；全军应用基础研究项目（BWS14J046）；江苏省青年医学人才项目（QNRC2016846）

目的：阐述单克隆抗体anti-SraPL-Lectin在小鼠巨噬细胞吞噬杀伤金黄色葡萄球菌过程中的功能。方法：PCR扩增sraP相应基因片段，并克隆至pET28a表达载体，用0.1 mmol/L 异丙基硫代半乳糖苷（isopropyl β-D-thiogalactoside，IPTG）诱导表达，镍柱纯化重组蛋白，经Western blot分析anti-SraPL-Lectin的特异性，采用qPCR检测巨噬细胞炎症因子诱导表达水平，CCK8检测金黄色葡萄球菌的增殖抑制率，涂板计数巨噬细胞上清和裂解液中金黄色葡萄球菌的菌落数。结果：anti-SraPL-Lectin不仅能与不同截短类型的SraP重组蛋白结合，而且能与金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白发生特异性结合；anti-SraPL-Lectin能下调小鼠巨噬细胞促炎因子［肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素（interleukin，IL）-1β、IL-12p40］的表达并上调抑炎因子（IL-10）的表达。庆大霉素和anti-SraPL-Lectin共同作用下，未见金黄色葡萄球菌出现明显的增殖。anti-SraPL-Lectin能降低巨噬细胞上清中金黄色葡萄球菌的载量。结论：单克隆抗体anti-SraPL-Lectin与金黄色葡萄球菌形成免疫复合物能减轻巨噬细胞的炎症反应，促进巨噬细胞对金黄色葡萄球菌的清除。

来源：2019年第4期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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