南京医科大学学报(自然科学版)

作者：韩宏浩,俞 敏,孔 辉,解卫平

单位：南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症学科，江苏 南京 210029,

关键词：肺纤维化;紫杉醇;成纤维细胞;TGF⁃β1

基金：国家科技重大专项（2018ZX10722301?002）；国家自然科学基金（81273571，81870054）；江苏省卫生厅重点项目（H201601）；江苏省临床医学研究中心支撑体系建设（BL2014084）

目的：研究紫杉醇（paclitaxel，PTX）对重组人转化生长因子-β1（recombinant human transform growth factor-β1，rhTGF-β1）诱导人肺成纤维细胞（human lung fibroblasts，HLFs）向肌成纤维细胞转化的影响及其相关机制。方法：培养HLFs，药物处理分为对照组、TGF-β1组（5 ng/mL）、TGF-β1+PTX（0.01 nmol/L）组、TGF-β1+ PTX（0.1 nmol/L）组、TGF-β1+ PTX（1 nmol/L）组、PTX组（1 nmol/L）。采用CCK8法测定细胞活性；显微镜下观察并分析细胞形态学变化；Transwell实验检测细胞迁移能力；免疫荧光观察细胞内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达及分布情况；real-time PCR和Western blot检测各组α-SMA、纤连蛋白（fibronectin）、Ⅰ型胶原蛋白（collagen Ⅰ）、Ⅲ型胶原蛋白（collagen Ⅲ）mRNA水平及蛋白含量；Western blot检测各组细胞内p-Smad3、Smad3、p-p38和p38蛋白含量。结果：CCK8结果显示，1 nmol/L PTX对细胞无毒性作用，0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF-β1诱导的HLFs活性增加，0.1和1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF-β1诱导的HLFs活性增加；细胞形态学结果显示，0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF-β1诱导的HLFs胞体宽度增加，0.1、1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF-β1诱导的HLFs胞体宽度增加；Transwell实验结果显示，0.01 nmol/L PTX不能抑制TGF-β1诱导的HLFs迁移，0.1、1.0 nmol/L PTX可以抑制TGF-β1诱导的HLFs迁移；免疫荧光结果显示，0.01 nmol/L PTX不能降低TGF-β1诱导的HLFs内α-SMA荧光强度，0.1、1.0 nmol/L PTX可以降低TGF-β1诱导的HLFs内α-SMA荧光强度；real-time PCR和Western blot结果显示，0.01 nmol/L PTX不能降低TGF-β1诱导的HLFs表型转化标志物α-SMA、fibronectin、collagenⅠ、collagenⅢ含量及p38的磷酸化水平，0.1、1.0 nmol/L PTX可以降低TGF-β1诱导的HLFs表型转化标志物α-SMA、fibronectin、collagenⅠ、collagen Ⅲ含量以及Smad3和p38的磷酸化水平。结论：紫杉醇可以抑制TGF-β1诱导原代HLFs向肌成纤维细胞表型转化，这种作用可能与抑制TGF-β/Smad/MAPK信号通路激活有关。

来源：2019年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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