南京医科大学学报(自然科学版)

作者：何 昀,张美玲,胡媛萍,李建涛,阙玲琍,李跃华

单位：南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,

关键词：ECSIT;线粒体靶向过表达;转基因小鼠

基金：国家自然科学基金（81470418）

目的：构建线粒体靶向过表达ECSIT转基因小鼠，并对其进行鉴定和心功能分析，建立ECSIT基因相关功能研究模型动物。方法：构建过表达打靶载体pCAG-OTCL-ECSIT-3Xflag-BPA，采用电转导方法将线性化打靶载体转入胚胎干细胞（ES细胞）；将含有过表达载体的ES细胞进行囊胚腔注射，并将嵌合囊胚移植至代孕小鼠体内，繁殖嵌合体小鼠。嵌合体小鼠和 C57BL/6J 鼠交配繁殖出杂合子，PCR 筛选阳性过表达小鼠。采用小动物超声分析线粒体靶向过表达ECSIT小鼠的心功能。结果：成功构建了线粒体靶向过表达ECSIT载体pCAG-OTCL-ECSIT-3Xflag-BPA，经PCR鉴定为阳性；完成线粒体靶向过表达ECSIT基因打靶及囊胚注射，经PCR鉴定为阳性；分别提取转基因小鼠心肌组织线粒体和胞浆蛋白，检测发现线粒体特异性过表达ECSIT。8周龄转基因小鼠心功能与同龄野生型小鼠无明显差异。结论：成功构建出线粒体靶向过表达ECSIT小鼠；线粒体过表达ECSIT对8周龄小鼠心功能无明显影响。

来源：2019年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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