南京医科大学学报(自然科学版)

作者：李 涛,蒋 伟,顾 璇,李 冰,王静静,施 晓,郭娇娇,唐 奇,冯振卿,季国忠

单位：南京医科大学第二附属医院消化医学中心，江苏 南京 210011；江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学第二附属医院消化医学中心，江苏 南京 210011；江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166；南京医科大学病理学系，江苏 南京 211166；国家卫健委抗体技术重点实验室，江苏 南京 211166,,江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166；南京医科大学病理学系，江苏 南京 211166；国家卫健委抗体技术重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学第二附属医院消化医学中心，江苏 南京 210011；江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学第二附属医院消化医学中心，江苏 南京 210011；江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166；南京医科大学病理学系，江苏 南京 211166；国家卫健委抗体技术重点实验室，江苏 南京 211166,,江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166；南京医科大学病理学系，江苏 南京 211166；国家卫健委抗体技术重点实验室，江苏 南京 211166,,江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166；南京医科大学病理学系，江苏 南京 211166；国家卫健委抗体技术重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学第二附属医院消化医学中心，江苏 南京 210011；江苏省肿瘤个体化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,

关键词：双特异性单链抗体;c⁃Met;PD⁃L1

基金：国家自然科学基金面上项目（8177111723）；江苏省科学技术厅重点研发专项基金（BE2016799）

目的：通过优化设计、构建c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白，探究重轻链不同组合形式对c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与肿瘤抗原结合的亲和性和特异性的影响。方法：使用生物信息学分析、基因工程抗体技术设计、优化及制备重轻链不同组合的双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白CP1、CP2、PC1、PC2；生物分子相互作用分析仪BLItz分析融合蛋白对重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力，ELISA法分析其抗原结合特异性。结果：成功制备双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白，融合蛋白CP1与重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合特异性均优于CP2、PC1和PC2。结论：重轻链不同组合形式会影响c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与c-Met和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合的特异性，融合蛋白CP1的亲和力和抗原结合的特异性最高，其对应的重轻链组合形式可用于c-Met/PD-L1 CAR表达载体的构建。

来源：2019年第10期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

查看南京医科大学学报(自然科学版)杂志2019年第10期