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国内刊号：32-1442/R
国际刊号：1007-4368
发布日期:
作者：何 佳,曹 倩,周国平
单位：南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,
关键词：胸腺基质淋巴生成素;启动子;转录调控
基金：国家自然科学基金（81970579）
目的：构建人短链胸腺基质淋巴生成素（short isoform thymic stromal lymphopoietin，sfTSLP）启动子全长及其长度不等片段的萤光素酶报告质粒，以确定启动子活性区域并预测功能性转录因子结合位点。方法：使用按基因组序列设计的引物，通过PCR分离人sfTSLP启动子片段，并将之插入萤光素酶报告基因载体pGL3-basic中。通过步移缺失构建其截短片段，通过双萤光素酶报告基因系统测定所有启动子缺失克隆在HEK-293细胞中的活性，并使用生物信息学手段预测其潜在的转录结合位点。结果：经菌液PCR、双酶切、测序，成功构建了人sfTSLP启动子及其截短片段萤光素酶报告质粒，并确定其启动子活性区域位于5′侧翼区-200~+25 nt区域内，且可能含有SP1/SP3、SPI1/SPIB、TCF3、ETS1等转录因子结合位点。结论：首次对人sfTSLP启动子区进行了研究，初步确定了其启动子活性区域及可能的转录因子结合位点，为更进一步的研究指明了方向。
来源：2020年第1期
《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部
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