南京医科大学学报(自然科学版)

作者：奚佩雯,胡 玥,张 旭,戴欣媛,石 靓,丁 强

单位：南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院乳腺病中心， 江苏 南京 210029,

关键词：乳腺癌;RNA结合蛋白7;P21;细胞周期

基金：国家自然科学基金（81572595）

目的：探索RNA结合蛋白7（RNA binding protein 7，RBM7）在人源性乳腺癌细胞BT474中的过表达及干扰后的表达改变，并研究其与P21之间的关系。方法：在人源性乳腺癌细胞BT474中分别转染RBM7过表达、干扰慢病毒（实验组）和相应对照慢病毒（对照组），从而构建稳定转染的细胞株，用qRT-PCR和Western blot实验分别验证转染后的RBM7的表达情况。用CCK-8实验、流式细胞周期实验分别评估RBM7表达改变后对乳腺癌细胞增殖能力和细胞周期分布的影响。通过qRT-PCR和Western blot实验观察BT474细胞中RBM7表达改变后对P21表达的影响。进一步通过RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP）实验来研究RBM7与P21之间的关系。结果：在乳腺癌细胞BT474中分别转染RBM7过表达、干扰慢病毒48 h后，通过荧光显微镜检测细胞的绿色荧光表达情况；经嘌呤霉素稳定筛选后，获得RBM7过表达及干扰的稳转细胞株。CCK-8和流式细胞周期实验显示，过表达RBM7后可促进乳腺癌细胞的增殖，而干扰RBM7后能抑制乳腺癌细胞的增殖。qRT-PCR和Western blot实验显示，过表达RBM7能下调P21的mRNA（P < 0.05）及蛋白的表达，干扰RBM7能上调P21的mRNA（P < 0.05）及蛋白的表达。RNA结合蛋白免疫共沉淀（RIP）实验显示，RBM7能直接结合P21的mRNA从而发挥其对P21的调节作用。结论：RBM7在人乳腺癌细胞BT474中通过结合P21的mRNA从而下调P21的表达。

来源：2020年第2期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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