南京医科大学学报(自然科学版)

作者：黄 欢,卢守莲,王 珏,孙丽洲

单位：南京医科大学第一附属医院产前诊断中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院产前诊断中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院产前诊断中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院产前诊断中心，江苏 南京 210029,

关键词：骨骼发育异常;FGFR3;COL1A2;产前诊断;基因分析

基金：江苏省妇幼健康重点人才（FRC201744），；江苏省青年医学重点人才（QNRC2016618）；江苏省医学重点学科（实验室）（ZDXKA2016002）

目的：以最原始的羊水样本为起始模板直接进行PCR扩增，建立一种快速、简便的骨骼发育异常单基因遗传病的产前基因诊断方法。方法：对2013年4月—2018年1月于南京医科大学第一附属医院就诊的超声提示骨骼发育异常的38例胎儿行羊膜腔穿刺并进行软骨发育不全、软骨发育低下、致死性发育不全及成骨发育不全4种单基因遗传病诊断，抽取孕妇羊水后不经过胎儿细胞培养，也不经过羊水中胎儿细胞DNA的提取，加入中性盐等物质作为PCR缓冲液，控制缓冲液pH值为8~10，扩增FGFR3及COL1A2基因上的靶标片段，直接在反应体系中加入8 μL羊水进行PCR扩增测序，行产前基因诊断；考察扩增体系中的成分及含量对羊水直接扩增方法的影响。结果：38例胎儿样本中检出单基因遗传病致死性发育不全3例，分别为Ⅰ型1例，Ⅱ型2例；软骨发育不全3例，软骨发育低下1例。中性盐缓冲液、0.20 U/μL Promega Taq DNA聚合酶、每条引物1.2 pmol/μL用于羊水直接扩增效率最佳。结论：本方法省略了羊水细胞培养和羊水中胎儿DNA核酸提取这两步繁琐步骤，无需浓缩羊水即可直接扩增，缩短了诊断时间，节约了诊断成本，可以减少PCR过程中可能出现的样本交叉污染，是一种很有前景的快速产前基因诊断新方法。

来源：2020年第3期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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