南京医科大学学报(自然科学版)

作者：张恒璐,陈天宇,王苏雨,李 婉,陆卫平

单位：南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,,南京医科大学病原微生物学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学附属淮安第一医院内分泌科，江苏 淮安 223300,

关键词：羧肽酶E;小鼠肾小球系膜细胞;糖尿病肾病;增殖;凋亡

基金：江苏省卫生健康委员会课题（H201458）；淮安市533英才工程科研项目资助计划（HAA201744）

目的：探究羧肽酶E（carboxypeptidase E，CPE）对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell，GMC）增殖、周期及凋亡的影响。方法：PCR法扩增CPE基因片段，将其插入表达载体 pcDNA3.1质粒中以构建重组质粒pcDNA3.1-CPE。将质粒转染GMC细胞，通过蛋白质免疫印迹法检测CPE标签蛋白、增殖标志物细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）以及凋亡标记物Cleaved-caspase-3的表达；采用平板克隆、Cell Counting Kit-8（CCK-8）法以及流式分析法检测过表达CPE对高糖培养的GMC细胞增殖、细胞周期以及凋亡的影响。结果：成功构建CPE过表达的GMC细胞。平板克隆以及CCK-8实验表明，过表达CPE可以抑制GMC细胞的增殖能力。流式细胞学检测表明，与对照组相比，CPE过表达明显促进了细胞凋亡；细胞周期中G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少，差异有统计学意义（P < 0.01）。结论：过表达CPE可以抑制高糖培养的小鼠GMC细胞增殖并诱导细胞凋亡。

来源：2020年第3期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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