南京医科大学学报(自然科学版)

作者：罗 灿,王文博,吴志皎,刘龙飞,谢梦晓,邱 文,张 婧,赵 聃,季明德,王迎伟

单位：南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,,南京中医药大学附属江苏省中医院检验科，江苏 南京 210029,,南京医科大学基础医学院免疫学系，江苏 南京 211166,

关键词：sublytic C5b⁃9;肾小球系膜细胞（GMC）;krüppel样因子5（KLF5）;白细胞介素⁃36α（IL⁃36α）

基金：国家自然科学基金（81603358，31770934，81971468）

目的：探讨转录因子Krüppel样因子5（Krüppel-like factor，KLF5）调控sublytic C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞（glomerular mesangial cell，GMC）合成促炎因子白细胞介素（interleukin，IL）-36α的作用。方法：首先，培养大鼠GMC，体外用sublytic C5b-9刺激GMC后，不同时间点行反转录聚合酶链式反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blot）检查KLF5、IL-36α mRNA和蛋白水平的变化。接着，构建KLF5的过表达（pIRES2-KLF5）及发夹状小干扰RNA（shKLF5）质粒。将pIRES2-KLF5转染GMC或在shKLF5转染GMC后再用sublytic C5b-9刺激，行RT-PCR和Western blot检查过表达或沉默KLF5基因后对GMC合成IL-36α的影响。同时用荧光素酶报告实验检查过表达或沉默KLF5基因对IL-36α启动子活性的影响。结果：用sublytic C5b-9刺激GMC，能显著上调KLF5和IL-36α的mRNA和蛋白表达，且KLF5的表达时相早于IL-36α。过表达KLF5能上调IL-36α的生成，而沉默KLF5基因后再行sublytic C5b-9刺激，由GMC产生的IL-36α则显著下降。sublytic C5b-9刺激GMC或过表达KLF5基因均可提高IL-36α启动子的活性，而沉默KLF5基因则能明显减低sublytic C5b-9上调IL-36α启动子的活性。结论：KLF5的表达对sublytic C5b-9诱导GMC合成IL-36α有促进作用。

来源：2020年第3期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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