南京医科大学学报(自然科学版)

作者：徐瑞瑞，李毓雯，胡平平，田安然，李 军，朱传龙

单位：南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,

关键词：EFTUD2;剪接体;启动子

基金：国家自然科学基金（81770591，81800778）；江苏省医学重点人才（ZDRCA2016007）

目的：鉴定并分析EFTUD2（elongation factor Tu GTP-binding domain-containing 2）基因的启动子区域。方法：应用生物信息学技术对EFTUD2基因结构及潜在启动子区域进行分析，预测4个EFTUD2启动子序列。使用全基因合成技术以及高保真PCR扩增得到目的启动子序列，通过BglⅡ和NheⅠ双酶切，将目的条带克隆到双荧光素酶报告基因载体psiCHECK-2中，得到4个长度不同并覆盖EFTUD2基因转录起始位点附近约2 kb的EFTUD2基因启动子双荧光素酶报告基因重组体。荧光素酶分析检测启动子活性。结果：经酶切、测序鉴定，成功构建了人EFTUD2启动子荧光素酶报告基因重组质粒。通过荧光素酶活性检测，重组体EFTUD2-0.5的相对荧光素酶活性增加（P < 0.05），提示EFTUD2基因核心启动子序列位于转录起始位点附近约500 bp的区域内。结论：EFTUD2基因转录起始位点上游500 bp具有启动子活性，初步判定其核心启动子位于该区域。

来源：2020年第4期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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