南京医科大学学报(自然科学版)

作者：姚传霞，王怡雯，龚丹丹，李丽莉，马 艳，匡 衡，周婷婷，汪茂荣

单位：安徽医科大学解放军八一临床学院肝病中心，安徽 合肥 230000,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,南京医科大学附属妇产医院妇产科，江苏 南京 210004,,安徽医科大学解放军八一临床学院肝病中心，安徽 合肥 230000,,南京中医药大学附属解放军八一医院肝病中心，江苏 南京 210002,,安徽医科大学解放军八一临床学院肝病中心，安徽 合肥 230000,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,东部战区总医院秦淮医疗区肝病中心，江苏 南京 210002,

关键词：人源抗TLR4抗体IgG2;对乙酰氨基酚;炎症因子;细胞凋亡

基金：国家“十二五”规划项目（2013ZX09J13110?05B）；江苏省社会发展项目资助（BE2018617）；中国重点技术重点项目基金（2018YFC1200603）

目的：研究人源抗TLR4 抗体IgG2（human-TLR4 IgG2，hTLR4 IgG2）对对乙酰氨基酚（acetaminophen，APAP）诱导肝损伤的保护效应，探讨其在药物性肝损伤中的保护作用。方法：以人源抗TLR4 抗体Fab基因为模板，扩增其可变区基因，构建人源抗TLR4抗体IgG2真核表达载体，转染CHO-S细胞，筛选稳定表达细胞株，收集细胞上清，Protein G柱纯化抗TLR4抗体IgG2。将18只C57BL/6J 小鼠随机分成3组：生理盐水组、APAP（600 mg/kg）组和APAP +hTLR4 IgG2（5 mg/kg）组，统计小鼠腹腔注射APAP后 24 h的存活率；重复上述实验分组，检测小鼠腹腔注射APAP 8 h后，血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase，AST）、白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的表达水平，取肝脏做病理分析并使用Western blot检测凋亡蛋白的表达。结果：成功构建并表达纯化人源抗TLR4抗体IgG2；ELISA结果显示，抗体效价为1∶204 800。与APAP组相比，APAP+hTLR4 IgG2组小鼠的24 h存活率显著增加（P < 0.05）；血清AST、ALT以及炎性细胞因子的表达水平显著降低，具有统计学意义（P < 0.05）；病理分析结果显示，与模型组相比，人源抗TLR4抗体IgG2治疗组的小鼠肝组织炎性细胞浸润、充血和坏死等症状明显改善；Western blot结果显示凋亡相关蛋白的表达减少。结论：人源抗TLR4抗体IgG2能够抑制炎症因子的表达及细胞凋亡，对APAP诱导的小鼠肝损伤有显著的保护作用。

来源：2020年第5期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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