南京医科大学学报(自然科学版)

作者：张 培，张园园，严君君，李梦羽，周希乔*

单位：南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,

关键词：非酒精性脂肪性肝炎;S1PR2;前蛋白转化酶枯草溶菌素9;脂代谢

基金：国家自然科学基金（81570522）；江苏省卫健委强卫工程青年人才（QNRC2016568）

探讨1⁃磷酸⁃鞘氨醇受体2（sphingosine⁃1⁃phosphate receptor 2，S1PR2）、前蛋白转化酶枯草溶菌素9（propro⁃ tein convertase subtilisin/kexin type 9，PCSK9）对非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝脏损伤可能的调控 机制。方法：将12只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和实验组，对照组给予普通饮食，实验组给予蛋氨酸⁃胆碱缺乏饮食（methio⁃ nine choline deficiency diet，MCD），MCD 6周建立NASH模型。6周末ELISA检测血清和肝脏生化指标丙氨酸氨基转移酶（ala⁃ nine aminotransferase，ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、谷氨酰转移酶（glutamyl transferase，GGT） 及炎症因子肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF⁃α）、白细胞介素6（interleukin⁃6，IL⁃6）、γ⁃干扰素（interferon⁃γ，IFN⁃ γ）的水平；HE 染色、油红O染色和天狼星红染色分别观察肝脏炎症、脂质沉积和纤维化情况。小鼠原代肝细胞和HepG2细胞 分别予棕榈酸和/或JTE⁃013（S1PR2 特异性抑制剂）处理，油红O染色观察肝细胞内脂质沉积情况，蛋白免疫印迹实验检测 S1PR2、PCSK9和低密度脂蛋白受体（low density lipoprotein cholesterol receptor，LDLR）的蛋白表达。构建S1PR2干扰、过表达质 粒，分别转染 HepG2 细胞，进行转录组测序寻找 S1PR2 潜在关联基因，并在 NASH 造模小鼠中检测筛选出的基因的表达情 况。结果：喂养6周后实验组小鼠较对照组肝组织S1PR2表达减少、PCSK9表达增加；使用JTE⁃013可加重小鼠肝原代细胞和 HepG2细胞内脂质沉积，使ERK磷酸化增加，PCSK9表达升高、LDLR降低；S1PR2干扰、过表达质粒分别转染的HepG2细胞 中，共有343种基因发生改变，其中早期生长反应蛋白1（early growth response protein 1，Egr1）在S1PR2过表达时增加、干扰时降 低，并在NASH模型小鼠中表达减少。结论：S1PR2参与NASH的脂质沉积和炎症损伤过程，这可能与炎症状态下S1PR2被抑 制后促进PCSK9表达，降低LDLR表达有关。

来源：2020年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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