南京医科大学学报(自然科学版)

作者：王 铮，张少坤，温洪华，韦 晓，刘 超，缪 珩，祝 群

单位：南京医科大学第二附属医院内分泌科，江苏 南京 210011,,南京医科大学第二附属医院内分泌科，江苏 南京 210011,,南京医科大学第二附属医院内分泌科，江苏 南京 210011,,江苏省中西医结合医院内分泌代谢病研究中心，江苏 南京 210028,,江苏省中西医结合医院内分泌科，江苏 南京 210028,,南京医科大学第二附属医院内分泌科，江苏 南京 210011,,南京医科大学第二附属医院内分泌科，江苏 南京 210011,

关键词：游离脂肪酸;脂多糖;中性神经酰胺酶;β细胞

基金：江苏省自然科学基金项目（BK20151577）

目的：探讨轻度增高的游离脂肪酸与脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）协同对大鼠胰岛β细胞株INS-1凋亡及胰岛素分泌的影响及机制。方法：采用0.125 mmol/L棕榈酸和不同浓度的LPS（1、10、50 ng/mL）单独、联合作用INS-1细胞24 h，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测Cleaved caspase-3表达；棕榈酸和LPS（50 ng/mL）单独或联合刺激INS-1细胞24 h后，HPLC法检测中性神经酰胺酶（neutral ceramidase，NCDase）活性，ELISA法检测胰岛素分泌功能；并观察转染pEGFP-C3-NCDase重组质粒后，棕榈酸和LPS刺激的INS-1细胞凋亡率及胰岛素分泌功能的改变。结果：与对照组相比，棕榈酸或LPS（50 ng/mL）单独处理，对INS-1细胞凋亡及胰岛素分泌无明显影响，但两者联合可明显增加凋亡率及Cleaved caspase-3表达（P < 0.05）。棕榈酸联合LPS作用24 h后明显抑制基础胰岛素分泌（P < 0.01），对细胞内胰岛素含量及葡萄糖刺激的胰岛素分泌无影响。此外，棕榈酸或LPS单独刺激不影响INS-1细胞NCDase，两者联合则显著抑制其活性（P < 0.01）；而高表达NCDase能明显缓解棕榈酸联合LPS诱导的凋亡和基础胰岛素分泌减少（P < 0.05）。结论：轻度增高的游离脂肪酸联合LPS可通过抑制鞘脂信号分子代谢的关键酶——NCDase活性，促进胰岛β细胞凋亡并抑制基础胰岛素分泌。

来源：2020年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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