南京医科大学学报(自然科学版)

作者：陈 伟，赵 麟，刘 宁，郑 平，任大斌，段 剑，冯九庚

单位：南昌大学第一附属医院神经外科，江西 南昌 330008；南京医科大学第一附属医院神经外科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院神经外科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院神经外科，江苏 南京 210029,,上海健康医学院附属上海浦东新区人民医院神经外科，上海 201299,,上海健康医学院附属上海浦东新区人民医院神经外科，上海 201299,,南昌大学第一附属医院神经外科，江西 南昌 330008,,南昌大学第一附属医院神经外科，江西 南昌 330008,

关键词：GJA1⁃20k;星形胶质细胞;神经元;线粒体;氧化应激

基金：国家自然科学基金（81701231）；上海市自然科学基金（16ZR1431500）

目的：观察星形胶质细胞（astrocyte）通过上调神经元（neuron）内源性缝隙连接蛋白α1截短单体-20k（gap junction protein alpha 1 truncated monomer- 20k，GJA1-20k）参与氧化应激损伤后神经保护作用的机制。方法：采用C57BL/6胎鼠以原代培养法获取神经元及星形胶质细胞，建立共培养模型，给予神经元过氧化氢（H2O2）损伤，及星形胶质细胞胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）受体阻滞剂AG1024，分别设立Neuron组、Neuron+Stress组、Neuron+Astrocyte +Stress组及Neuron+Astrocyte+Stress+AG1024组，通过Western blot测定神经元GJA1-20k、去磷酸化（non-phosphorylated，NP）-Cx43的表达，谷氨酸转运酶（glutamate transporter-1，GLT-1）、线粒体功能相关蛋白（PGC-1α、mtTFA、Tom20、CoxⅣ）、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Caspases-9）的变化，采用酶联免疫荧光分析（ELFA）及ELISA法分别检测氧化应激因子NAPDH 氧化酶活性和白介素（interleukin，IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等炎性因子含量的变化，采用Annexin V-FITC/PI测定神经元凋亡。结果：星形胶质细胞共培养可明显上调在神经元氧化损伤后内源性GJA1-20k和NP-Cx43表达，抑制PGC-1α、mtTFA、Tom20、CoxⅣ的下调，上调凋亡抑制因子Bcl-2表达，下调凋亡促进因子Bax、Caspase-9表达，降低NAPDH氧化酶活性，降低炎性产物IL-1β、IL-6和TNF-α的水平及抑制神经元的凋亡（P < 0.05）。在给予AG1024后，可明显抑制与以上因素相关的星形胶质细胞对神经元的保护作用（P < 0.05）。结论：与IGF-1相关的星形胶质细胞对神经元的保护机制可能与增加神经元内源性GJA1-20k的含量及线粒体功能的保护有关。

来源：2020年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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