南京医科大学学报(自然科学版)

作者：顾俊杰，朱彩强，朱作佺，孙新臣，张 姝

单位：南京医科大学第一附属医院放疗科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院放疗科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院放疗科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院放疗科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院放疗科，临床研究中心，江苏 南京 210029,

关键词：DJ⁃1;食管鳞癌;辐照;迁移;侵袭

基金：国家自然科学基金（81874217，81672983）

目的：探究敲低DJ-1/PARK7表达及联合辐照对食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法：利用短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）稳定转染食管鳞癌细胞kyse150和kyse450，敲低DJ-1表达。Western blot检测细胞转染效率。Transwell迁移实验检测梯度辐照（0、4、6、8 Gy）下食管鳞癌细胞的迁移能力。将转染空病毒的对照组（shRNA-Control）与 DJ-1敲低组（shRNA-DJ-1）细胞进行 6 Gy X线辐照，细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验检测各组食管鳞癌细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测上皮细胞-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）途径相关蛋白上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2，MMP2）的表达变化。结果：敲低DJ-1后，食管鳞癌细胞kyse150和kyse450内DJ-1蛋白表达水平明显降低。Transwell迁移实验显示，6 Gy剂量辐照诱导食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移能力最强。细胞划痕实验及Transwell迁移侵袭实验显示，在6 Gy辐照条件下敲低DJ-1后kyse150和kyse450细胞迁移和侵袭能力减弱。Western blot显示，敲低DJ-1联合辐照后E-cadherin表达上升，N-cadherin表达下降，MMP2表达下降。结论：敲低DJ-1表达可以降低辐照诱导的食管鳞癌细胞kyse150和kyse450的迁移和侵袭能力，其机制可能与通过上调E-cadherin、下调N-cadherin和MMP2蛋白表达从而抑制细胞EMT进程有关。

来源：2020年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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