南京医科大学学报(自然科学版)

作者：李真真，覃莲菊，宁 松，崔毓桂，马 翔，刘嘉茵

单位：南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院临床生殖医学中心，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029,

关键词：多囊卵巢综合征;高雄激素;人胚胎干细胞;诱导分化;下丘脑神经祖细胞

基金：国家自然科学基金（81571403，81671447）

目的：研究体外诱导人胚胎干细胞（human embryonic stem cell，hESC）向下丘脑神经祖细胞分化，并以此为细胞模型，观察不同浓度雄激素对下丘脑神经祖细胞分化的影响。方法：鉴定hESC细胞株CCRM22，体外诱导CCRM22向下丘脑神经祖细胞分化，对其进行初步的细胞生物学鉴定；在分化培养基中添加1×10-8mol/L、1×10-7mol/L睾酮（以无水乙醇为助溶剂对照），收集不同分化时期细胞，比较分化效率；利用RT-qPCR、流式细胞术、免疫荧光检测等方法鉴定分化细胞，并检测生殖功能调控相关基因的表达。结果：CCRM22分化为下丘脑神经祖细胞的效率超过85%，但睾酮处理降低其分化效率；分化细胞表达神经细胞标志物NESTIN以及下丘脑神经祖细胞特异性标志物NKX2.1，同时表达KISS1和雄激素受体（androgen receptor，AR），且AR的表达水平与睾酮浓度呈正相关。结论：成功诱导hESC分化形成下丘脑神经祖细胞，高浓度睾酮处理抑制hESC向下丘脑神经祖细胞分化，该细胞模型可应用于后续体外研究多囊卵巢综合征女性孕早期高雄激素环境对后代下丘脑神经细胞分化和发育的影响。

来源：2020年第9期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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