南京医科大学学报(自然科学版)

作者：陈 绩，杨传熙，徐天华，孙 伟，孔祥清，盛燕辉

单位：南京医科大学第一附属医院心内科，江苏 南京 210029,,东南大学医学院，江苏 南京 211189,,南京医科大学第一附属医院心内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院心内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院心内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院心内科，江苏 南京 210029,

关键词：炎症;低强度脉冲式超声波;巨噬细胞;M1表型;吞脂能力;NF⁃κB/MAPK通路

基金：国家重大科研仪器研制项目（81627802）

目的：探究低强度脉冲式超声波（low-intensity pulsed ultrasound，LIPUS）对巨噬细胞极化与吞脂能力的潜在影响及其相关分子机制。方法：采用胫骨骨髓灌注法提取小鼠骨髓来源的巨噬细胞，分别用不同强度（4.825、19.300、43.425 mW/cm２）的LIPUS对巨噬细胞进行辐照处理，再给予脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导巨噬细胞向M1型极化；采用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡水平；CCK-8法检测巨噬细胞活性；热电偶测温技术检测LIPUS热效应；实时荧光定量PCR（qPCR）分析M1型巨噬细胞标志基因的mRNA水平；Western blot检测NF-κB/MAPK 通路相关蛋白表达；采用荧光染料DiI标记的氧化低密度脂蛋白与巨噬细胞共同孵育6 h，荧光显微镜观察并计算巨噬细胞的脂滴吞噬效率。结果：流式细胞术和CCK-8结果表明，不同强度LIPUS辐照处理均未对巨噬细胞的凋亡和细胞活性产生影响；热电偶测温技术表明，温度变化稳定，未产生明显热效应。qPCR结果显示，与对照组相比，LPS能显著上调巨噬细胞M1表型基因的mRNA水平，而LIPUS辐照处理可下调LPS诱导的M1表型基因mRNA水平，差异具有统计学意义；脂滴吞噬染色结果显示，LPS能够增强巨噬细胞的吞脂作用，而LIPUS辐照处理能减弱LPS对巨噬细胞吞脂能力的促进作用，差异具有统计学意义；Western blot结果显示，LIPUS能够下调LPS诱导的NF-κB/MAPK通路蛋白水平，差异具有统计学意义。结论：LIPUS可能通过抑制LPS活化的NF-κB/MAPK通路阻止巨噬细胞向M1型极化以及减弱巨噬细胞的吞脂能力。

来源：2021年第4期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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