南京医科大学学报(自然科学版)

作者：陆 敏，卢 伟，杨 勰，孙 颖

单位：南京医科大学附属口腔医院牙周科，江苏 南京 210029；南京医科大学江苏省口腔疾病研究重点实验室，江苏 南京 210029；江苏省口腔转化医学工程中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学附属口腔医院牙周科，江苏 南京 210029；南京医科大学江苏省口腔疾病研究重点实验室，江苏 南京 210029；江苏省口腔转化医学工程中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学附属口腔医院牙周科，江苏 南京 210029；南京医科大学江苏省口腔疾病研究重点实验室，江苏 南京 210029；江苏省口腔转化医学工程中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学附属口腔医院牙周科，江苏 南京 210029；南京医科大学江苏省口腔疾病研究重点实验室，江苏 南京 210029；江苏省口腔转化医学工程中心，江苏 南京 210029,

关键词：Wnt5a;中性粒细胞胞外诱捕网;ROS;PI3K/Akt;MEK1/2⁃ERK1/2

基金：国家自然科学基金（81771075）；江苏高校优势学科建设工程资助项目（2018?87）；南京医科大学科技发展基金（2016NJMU052）

目的：探讨Wnt5a对中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular trap，NET）形成的影响及可能的调控机制。方法：采用50 ng/mL Wnt5a刺激人中性粒细胞3 h，以1 μg/mL牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，P.gingivalis）脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）和1 μg/mL大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）LPS作为阳性对照，采用免疫荧光技术观察NET的形成，Sytox Green荧光法对胞外DNA进行定量，采用流式细胞术检测细胞产生的活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，Western blot分析信号分子磷脂酰肌醇三激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/Akt和丝裂原活化蛋白激酶1/2（mitogen-activated protein kinase1/2，MEK1/2）、细胞外信号调节蛋白激酶1/2（extracellular regulated protein kinases1/2，ERK1/2）表达水平的变化。结果：Wnt5a刺激人中性粒细胞后，可观察到NET的形成和胞外DNA数量的增加（P < 0.05），ROS水平较刺激前明显增高（P < 0.05），Western blot检测显示，PI3K/Akt和MEK1/2、RK1/2磷酸化水平增高（P < 0.05）。结论：Wnt5a可能通过PI3K/Akt、MEK1/2、ERK1/2磷酸化，调控ROS生成，进而促进人中性粒细胞形成NET。

来源：2021年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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