南京医科大学学报(自然科学版)

作者：周小蓉，陆 霞，李建涛，阙玲琍，李跃华

单位：南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,,南京医科大学心血管病转化医学协同创新中心，江苏 南京 211166,

关键词：3′非翻译区;3′RACE;ECSIT;microRNA;siRNA

基金：国家自然科学基金（82070234）

目的：鉴定成年小鼠Toll途径进化保守信号介导因子（evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathways，ECSIT）的3′非翻译区（3′-untranslated region，3′-UTR）序列，并在细胞中验证非编码RNA对ECSIT表达的影响。方法：采用RACE技术克隆得到小鼠ECSIT 3′-UTR序列，并与基因组数据库进行比对；预测ECSIT 3′-UTR可能结合的微小RNA（microRNA，miRNA），并针对ECSIT的全长序列设计小干扰RNA（siRNA）；通过Western blot分别检测使用不同miRNA和siRNA干扰后，细胞中ECSIT的表达。结果：成功鉴定了346 bp的小鼠ECSIT 3′-UTR，与NCBI上序列一致率达到99%；在细胞中miR-7-5p和siRNA1、2可以干扰ECSIT的表达。结论：成功鉴定得到成年小鼠心脏ECSIT mRNA 3′-UTR序列，该非编码区可作为非编码RNA的调控区域，为进一步从分子水平探明ECSIT在小鼠生长发育及疾病中的作用提供科学依据。

来源：2021年第7期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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