南京医科大学学报(自然科学版)

作者：徐抒语，李书书，王 丽，王 超，王守林

单位：南京医科大学生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 211166；南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，江苏 南京 211166,,南京医科大学生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 211166；南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室，江苏 南京 211166,

关键词：有机氯农药;滴滴涕;CYP2B6;生物转化;代谢产物

基金：国家自然科学基金（91743205，81903353，81803198）

目的：本研究选择细胞色素P450酶（cytochrome P450，CYP）2B6介导p，p’-滴滴涕（dichloro-diphenyl-trichloroethane，DDT）生物转化过程进行研究，为该类持久性有机污染物的风险评估和防治提供依据。方法：建立气相色谱/质谱联用仪（GC-MS/MS）的检测方法以检测生物样本中的p，p’-DDT；利用重组酶CYP2B6构建体外代谢模型，采用米式方程计算代谢动力学参数；采用抑制剂8-MOP验证CYP2B6对p，p’-DDT的代谢能力；构建SD大鼠体内代谢模型（大鼠CYP2B1是人CYP2B6的同源酶），尾静脉注射p，p’-DDT和CYP2B6的特异性抑制剂KR-Ⅱ，收集血清（0、5、10、20、30 min）以及肝脏微粒体，比较对照组以及抑制剂组大鼠肝脏中CYP2B1活性以及肝脏和血清中p，p’-DDT原形及代谢产物p，p’-DDE、p，p’-DDD水平的变化。结果：成功建立了多种DDT及代谢产物的 GC-MS/MS检测方法。体外代谢证实CYP2B6可代谢p，p’-DDT产生以p，p’-DDE为主的代谢产物，动力学参数Km为15.12 μmol/L，每纳摩尔P450酶的Vmax为12.8nmol/min；抑制剂8-MOP可显著抑制CYP2B6活性，代谢产物p，p’-DDE的含量显著下降。CYP2B1表达被抑制后，大鼠肝脏中CYP2B1的酶活性显著下降，肝脏和血清中的代谢产物p，p’-DDE和p，p’-DDD含量也明显降低。结论：CYP2B6可以代谢p，p’-DDT生成以p，p’-DDE为主的代谢产物，是DDT的主要优势代谢酶。考虑到人群中CYP2B6的表达和活性存在差异，本研究可为DDT暴露危害的易感人群筛选及风险评估的优化提供依据。

来源：2022年第3期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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