南京医科大学学报(自然科学版)

作者：吴汉章，陈 铖，谢彩蝶，吴 琳，毛慧娟

单位：南京医科大学第一附属医院肾内科，江苏 南京 210029；盐城市第一人民医院肾内科，江苏 盐城 224000,,南京医科大学第一附属医院肾内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院肾内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院肾内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院肾内科，江苏 南京 210029,

关键词：急性肾损伤;微小RNA;细胞凋亡;信号转导

基金：国家自然科学基金（81970639）；江苏省卫生和健康委员会科研项目（H2017023）

目的：探讨Notch3在顺铂诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）损伤中的表达变化及其潜在的相关上游微小RNA（microRNA，miRNA）调控机制。方法：体外培养HK-2细胞，Western blot及实时定量PCR检测Notch3在顺铂（20 μmol/L，24 h）诱导HK-2细胞凋亡模型及正常细胞中的表达；Targetscan预测靶向Notch3的miRNA，实时定量PCR测定相关miRNA在顺铂诱导HK-2细胞凋亡模型及正常细胞中的表达；然后，将HK-2细胞分别转染阴性对照模拟物（NC mimic）及miR-192-5p模拟物（miR-192-5p mimic），并依据给予或不给予顺铂处理（20 μmol/L，24 h），分为NC mimic组、NC mimic+Cisplatin组、miR-192-5p mimic组、miR-192-5p mimic+Cisplatin组。Western blot及实时定量PCR检测Notch3的表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率，研究miR-192-5p对顺铂所致肾小管上皮细胞凋亡及Notch3表达的影响；荧光素酶报告实验证实miR-192-5p与靶基因Notch3的靶向关系。结果：Notch3在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的表达上调，同时miR-192-5p在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的表达下调；实时定量PCR证实转染miR-192-5p模拟物后，miR-192-5p的表达量升高；过表达miR-192-5p能够减轻顺铂诱导的肾小管上皮细胞凋亡，同时负向调控Notch3的表达；荧光素酶报告实验结果表明miR-192-5p直接靶向作用于Notch3的3′-UTR，抑制Notch3的表达，证实Notch3是miR-192-5p的直接靶标。结论：miR-192-5p可通过直接抑制Notch3的表达而减轻顺铂所致的肾小管上皮细胞凋亡。

来源：2022年第4期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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