南京医科大学学报(自然科学版)

作者：张洪都，王红顺，王天明，姚 俊，曹 新

单位：南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166,,南京医科大学医学遗传学系，江苏 南京 211166,

关键词：氧化固醇结合蛋白样蛋白2;泛素特异性蛋白酶14;泛素化;去泛素化

基金：国家自然科学基金（81771000，82071052）

目的：研究泛素特异性蛋白酶14（ubiquitin-specific peptidase 14，USP14）通过调控氧化固醇结合样蛋白2（oxysterol binding protein-like 2，OSBPL2）的泛素化水平稳定OSBPL2表达的分子机制。方法：以HeLa细胞为工具细胞，通过对USP14过表达、敲降以及活性抑制，检测OSBPL2的表达水平；采用体外过表达实验考察USP14对OSBPL2的泛素信号和泛素化水平的调控；采用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation，Co-IP）阐明USP14与OSBPL2相互作用的具体结构域、不同结构域在蛋白相互作用中的作用以及OSBPL2的关键泛素化位点。结果：USP14与OSBPL2存在相互作用关系并稳定OSBPL2的表达而不改变其转录水平；体外过表达和Co-IP实验结果表明，USP14催化（catalytic，CAT）结构域与OSBPL2氧固醇结合蛋白相关结构域（OSBP-related domain，ORD）的相互作用降低OSBPL2的泛素化水平；类泛素（ubiquitin-like，UBL）结构域在USP14与OSBPL2相互作用中起到了促进作用；Lys209和Lys361是OSBPL2泛素化和去泛素化的关键位点。结论：USP14通过调控OSBPL2蛋白Lys209和Lys361两个位点的泛素化进而调控其泛素化水平，稳定OSBPL2蛋白的表达。

来源：2022年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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