南京医科大学学报(自然科学版)

作者：马泽萌，陈允梓

单位：南京医科大学基础医学院免疫学系,江苏 南京 211166,,南京医科大学基础医学院免疫学系,江苏 南京 211166,

关键词：维生素D受体;维生素D;核定位信号;转录调控

基金：国家自然科学基金(81873110)

目的：确定维生素D受体(vitamin D receptor，VDR)的核定位信号并验证其功能。方法：通过软件分析及文献调研预测VDR核定位信号，利用点突变试剂盒构建了VDR一系列点突变体，通过蛋白质免疫印迹检测VDR在胞质和胞核里的分布，并结合免疫荧光观察确定其预测突变点对VDR入核的影响，最后采用实时荧光定量链式聚合酶反应(quantitative real⁃time PCR，qPCR)检测 VDR 下游基因的表达，以判断 VDR 核定位突变体的活性。结果：确定 VDR 核定位信号序列为 49RRSMKRKALFLT61，构建的VDR一系列核定位序列(nuclear localization sequence，NLS)点突变体在细胞内的表达主要分布在胞质里，维生素D(vitamin D，VD)既不能诱导这些点突变体入核，也不能促进VD下游基因表达。结论：VDR核定位确定信号能有效控制VDR进入细胞核发挥转录因子作用，进而影响其下游基因的表达，为探索VD及VDR相关疾病的治疗提供新平台和思路。

来源：2022年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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