南京医科大学学报(自然科学版)

北大核心,CA,JST

国内刊号:32-1442/R

国际刊号:1007-4368

南京医科大学学报(自然科学版)杂志2022年第9期:重组酶介导的肠出血性大肠杆菌O157:H7等温扩增方法的建立

发布日期:

作者:蔡欣,王源林,赵杰,匡衡,孙学伟,刘宗财,崔茜,杨展,汪茂荣

单位:安徽医科大学八一临床学院东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室,安徽 合肥 230000 ;东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002,,东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002 ;中国人民解放军空军93801 部队医院医疗所,陕西 咸阳 712201,,东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002 ;南京医科大学第一临床医学院感染病科,江苏 南京 210029,,安徽医科大学八一临床学院东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室,安徽 合肥 230000,,东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002 ;滨州医学院基础医学院,山东 烟台 264003,,东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002 ;空军军医大学军事预防医学系,陕西 西安 710032,,东部战区空军医院呼吸内科,江苏 南京 210001,,东部战区疾病预防控制中心,江苏 南京 210002,,安徽医科大学八一临床学院东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室,安徽 合肥 230000,

关键词:EHEC O157:H7;RAA;快速检测

基金:国家自然科学基金(81871242);江苏省社会发展项目(BE2016617)

目的:建立新的快速检测常见食源性致病微生物肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7的方法。方法:根据EHECO157:H7保守区序列,结合重组酶介导的恒温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和荧光定量或胶体金侧向流免疫层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD),建立两种EHEC O157:H7检测方法(RAA荧光法和RAA-LFD法)并进行优化,评估这两种方法的灵敏性及特异性。结果:两种检测方法均可在39 ℃恒温条件下16 min内完成检测,两种方法的检测限均可达1×104 拷贝数,具有较高的灵敏性。两种方法与其他常见的肠道致病菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、弯曲菌、 耶尔森菌、志贺杆菌)质粒模板无交叉反应,具有良好的特异性。结论:本研究建立的两种检测EHEC O157:H7的方法,检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于EHEC O157:H7的快速检测。

来源:2022年第9期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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