南京医科大学学报(自然科学版)

作者：王一凡，谢金玉，陈迎玉，邓嘉欣，冯巧，韩欣，史震，周峰，刘晓梅

单位：江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,,江苏省免疫与代谢重点实验室,徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室,江苏 徐州 221004,

关键词：丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶25;星形胶质细胞;实验性自身免疫性脑脊髓炎;炎性因子

基金：国家自然科学基金(81971179)；江苏省自然科学基金(BK20191463)

目的：探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶25(serine/threonine protein kinase 25，STK25)对星形胶质细胞活化及实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠疾病进程的影响。方法：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55 (myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55，MOG35-55)诱导小鼠EAE模型，Real-time PCR、Western blot和ELISA法分别检测脊髓组织中STK25、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)与干扰素诱导蛋白-10(interferon-inducible protein-10，IP-10)的转录水平与蛋白表达；免疫荧光双标法检测STK25在脊髓星形胶质细胞中的表达。干扰素(interferon，IFN)-γ体外刺激小鼠原代星形胶质细胞后不同时间，上述方法检测STK25的蛋白表达及细胞因子的转录水平变化。将特异性靶向星形胶质细胞的对照及STK25敲减的重组慢病毒悬液感染星形胶质细胞后，IFN-γ刺激，测定TNF-α与IP-10的转录水平；同时给予小鼠病毒悬液 7 d后，诱导EAE模型，Western blot检测脊髓组织STK25的表达；Real-time PCR检测脊髓炎性因子与趋化因子转录水平。HE 和劳克坚牢蓝染色(Luxol fast blue，LFB)观察脊髓炎症细胞浸润与髓鞘损伤。结果：与对照组相比，EAE组小鼠STK25的表达水平显著降低，炎性因子与趋化因子的转录与分泌水平明显升高；同时脊髓组织星形胶质细胞STK25的表达明显下降。IFN-γ 体外刺激星形胶质细胞STK25表达降低时，炎性因子生成增加；进一步敲减星形胶质细胞内源性的STK25基因，体外星形胶质细胞及体内EAE小鼠脊髓中炎性因子与趋化因子的生成显著升高，同时加剧了EAE小鼠脊髓炎症细胞浸润与髓鞘脱失。结论：STK25可能通过影响星形胶质细胞的活化，调节炎性与趋化因子的产生，从而参与EAE小鼠的病变进程。

来源：2023年第3期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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