南京医科大学学报(自然科学版)

作者：夏芷晴，张紫晨，付麒，何云强，杨涛，孙敏

单位：南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,,盐城市第三人民医院内分泌科,江苏 盐城 224000,,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科,江苏 南京 210029,

关键词：精氨酸代琥珀酸合成酶;胰岛β细胞;增殖;凋亡

基金：国家自然科学基金(82070803)

目的：探讨精氨酸代琥珀酸合成酶-1(argininosuccinate synthetase 1，ASS1)对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法：利用siRNA和慢病毒载体在胰岛β-TC6细胞中分别敲低和过表达ASS1；5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2′- deoxyuridine，EdU)和CCK-8检测细胞增殖能力；Annexin V-PI流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(terminal dUTP nick-end labeling assay，TUNEL)检测细胞凋亡水平；Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell leukaemia-2，Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白 (Bcl-2 associated X protein，Bax)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase3)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase- 3)、凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor，AIF)、细胞核增殖抗原(Ki67)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein，mTOR)的表达水平；RT-qPCR检测AIF、Ki67和mTOR mRNA水平。结果：①与对照相比，敲低ASS1后，胰岛β细胞EdU阳性率和CCK-8细胞增殖活力降低，TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率升高。胰岛β细胞内AIF表达量明显升高，Bax/Bcl-2比值下降，Caspase-3活性降低。②过表达ASS1后，TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率均较对照组降低，伴随胰岛β细胞内Ki67和mTOR表达量升高。但胰岛β细胞EdU阳性率和CCK-8细胞增殖活力无明显变化。结论： ASS1 过表达可能激活 mTOR 信号通路促进胰岛β细胞增殖；ASS1 表达降低时，胰岛β细胞可通过 AIF 途径启动细胞凋亡。 ASS1可能在胰岛β细胞的增殖和凋亡中发挥一定调控作用。

来源：2023年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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