南京医科大学学报(自然科学版)

作者：龚洁，卜治文，徐晨，叶岚，谢婕

单位：南京医科大学生殖医学国家重点实验室,江苏 南京 211166,,南京医科大学生殖医学国家重点实验室,江苏 南京 211166,,南京医科大学生殖医学国家重点实验室,江苏 南京 211166,,南京医科大学生殖医学国家重点实验室,江苏 南京 211166,,南京医科大学生殖医学国家重点实验室,江苏 南京 211166,

关键词：RNA干扰;动物模型;Sox30;小鼠;睾丸

基金：国家自然科学基金项目(31871503，32070843，2022YFC2703501)

目的：建立快速、高效制备小鼠睾丸基因敲降的平台。方法：设计和构建靶向睾丸特异性表达基因Sox30转录本的 shRNA表达载体（pSliencer-GFP-shSox30）及其对照质粒（pSliencer-GFP-shScramble），与慢病毒颗粒包装后通过网微注射转导至出生24 d小鼠睾丸生精小管管腔，利用免疫荧光等检测慢病毒敲降鼠体内靶向基因的效率及敲降Sox30后对生殖细胞发育的影响。结果：慢病毒处理敲降后，相比对照组小鼠，shSox30病毒敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平显著下调，生精管腔中圆形精子发育阻滞在2~3步，Ⅶ~Ⅷ期生精管腔中无长型精子。结论：shRNA慢病毒有效降低小鼠睾丸靶基因的表达水平，在制备睾丸特定基因敲降动物模型中具有巨大优势。

来源：2023年第6期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

查看南京医科大学学报(自然科学版)杂志2023年第6期