南京医科大学学报(自然科学版)

作者：张丹萍，苏鑫，朱宏

单位：南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院消化内科，江苏 南京 210029,

关键词：反流性食管炎;线粒体DNA;cGAS-STING通路

基金：江苏省高层次人才“六个一”科研项目（LGY2016010）

目的：探讨酸性去氧胆酸（deoxycholic acid，DCA）诱导人正常食管上皮细胞（human esophageal epithelial cell，HEEC） 线粒体DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）损伤及释放与环岛苷酸-腺苷酸合酶-干扰素基因刺激蛋白（cyclic GMP-AMP synthase- stimulation of interferon gene，cGAS-STING）通路在食管上皮炎症发生发展中的关联。方法：将HEEC分为对照组和酸性DCA处理组。CCK-8法检测细胞存活率；荧光显微镜及流式细胞术检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）、线粒体活性氧（mito- chondrial reactive oxygen species，mtROS）及线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential，MMP）的变化；化学发光法检测三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）水平；透射电镜观察线粒体超微结构改变；RT-qPCR检测mtDNA拷贝数变化；Western blot检测γH2AX、cGAS、STING、p-NF-κB p65及NF-κB p65的蛋白表达水平；RT-qPCR检测炎症因子白细胞介素（interleukin， IL）-6及IL-1β的mRNA表达水平。结果：酸性DCA处理后细胞存活率呈剂量-时间依赖性降低；细胞内ROS及mtROS产生增多，同时MMP降低，ATP含量减少；与对照组相比，酸性DCA处理后γH2AX的表达水平升高；mtDNA释放入胞质，mtDNA拷贝数减少；cGAS、STING 和p-NF-κB p65表达升高；炎症因子IL-6及IL-1β表达升高；cGAS 抑制剂RU.521预处理抑制了cGAS、 STING的表达水平及部分抑制了p-NF-κB p65的表达水平，炎症因子IL-6及IL-1β水平降低。结论：体外实验表明，酸性DCA诱导HEEC线粒体功能障碍，mtDNA损伤及释放，介导HEEC炎症反应，其机制可能与cGAS-STING通路的激活有关。

来源：2023年第7期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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