南京医科大学学报(自然科学版)

作者：颜凤，周国平

单位：南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210009,,南京医科大学第一附属医院儿科，江苏 南京 210009,

关键词：Gas6;TFAP2A;启动子;转录调控;肾病综合征;凋亡

基金：国家自然科学基金（82270068）

目的：探究肾脏病相关生长抑制特异性基因6（growth arrest specific 6，Gas6）与肾脏疾病、凋亡的相关关系。研究转录因子AP-2a（transcription factor AP-2 alpha，TFAP2A）对基因Gas6的影响及其机制。方法：构建阿霉素肾病细胞模型，检测该模型中Gas6的表达变化；用Gas6蛋白刺激MPC5细胞，检测肾病相关指标的表达变化。用Gas6蛋白干预HEK-293T细胞，检测细胞凋亡率或凋亡相关指标的表达变化。构建Gas6启动子片段的萤光素酶基因报告重组质粒，检测Gas6基因启动子片段在 HEK-293T 细胞中的活性，预测 Gas6 启动子区的功能性转录因子结合位点并验证，在 HEK-293T 细胞中敲低或过表达 TFAP2A后检测Gas6启动子片段活性、mRNA表达、蛋白表达的变化。结果：Gas6在阿霉素肾病细胞模型中高表达，且过量的 Gas6可诱导MPC5细胞中肾病相关指标Nephrin和Podocin与阿霉素肾病细胞模型趋势相同。与对照组相比，Gas6蛋白组的细胞凋亡明显减少。成功构建有活性的Gas6基因启动子片段萤光素酶基因报告重组质粒，且在此片段内含有TFAP2A的结合位点。TFAP2A可在启动子、mRNA及蛋白水平对Gas6正向调控。结论：Gas6对肾病综合征的发生有促进作用，Gas6在HEK- 293T细胞中有抗凋亡作用，TFAP2A对Gas6有正向转录调控作用。

来源：2023年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

查看南京医科大学学报(自然科学版)杂志2023年第8期