南京医科大学学报(自然科学版)

作者：倪曼，程丽，郭爽，腊博雅，严正杰，崔毓桂，覃莲菊，刘嘉茵

单位：南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，生殖医学与子代健康全国重点实验室，江苏 南京 210029,

关键词：腐胺;线粒体相关内质网膜;卵母细胞;高龄

基金：国家重点研发项目（2021YFC2700404，2021YFC2700501）

目的：评估体外成熟（in vitro maturation，IVM）培养液中添加腐胺是否可改善高龄小鼠卵母细胞质量，及腐胺对高龄小鼠卵母细胞中线粒体相关内质网膜（mitochondria-associated endoplasmic reticulum membrane，MAM）的影响。方法：取生发泡期（germinal vesicle，GV）小鼠卵母细胞进行体外成熟培养至减数分裂（meiosis，M）Ⅱ期，分别使用8周龄小鼠卵母细胞作为年轻对照组，40周龄小鼠卵母细胞作为老龄对照组，IVM液中添加0.5 mmol/L腐胺的40周龄小鼠卵母细胞作为老龄实验组。通过检测MⅡ期卵母细胞的第一极体排出率、二细胞率、囊胚率、皮质颗粒分布、纺锤体异常率和染色体异常率评估卵母细胞的质量。使用透射电镜观察MⅡ期卵母细胞的MAM，qPCR检测MAM间Ca2+ 传递的关键分子含量，Ca2+ 探针测定线粒体、内质网和胞质的Ca2+ 水平，并通过检测线粒体膜电位、ATP含量和活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平评估线粒体功能。结果：腐胺提高了高龄小鼠卵母细胞的第一极体排出率（P < 0.05）和囊胚率（P < 0.05），并显著降低皮质颗粒分布异常率（P < 0.01）、纺锤体异常率（P < 0.01）和染色体异常率（P < 0.05）。腐胺可阻止高龄小鼠卵母细胞的MAM间距缩短变化（P < 0.001），降低其间Ca2+ 传递的关键分子含量（P < 0.05），缓解由MAM间Ca2+ 快速传递引起的线粒体钙超载（P < 0.001），从而改善线粒体功能 （P < 0.05），降低细胞内ROS水平（P < 0.001）。结论：体外成熟培养液中添加腐胺可显著改善高龄小鼠卵母细胞质量，且腐胺可通过影响MAM间Ca2+ 传递缓解线粒体钙超载，改善线粒体功能。

来源：2024年第7期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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