南京医科大学学报(自然科学版)

作者：周婷婷，郁心怡，纪雪雯，王桂芹，吴梓菡，闻瑜婷，朱进，刘新建

单位：东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,南京医科大学第一附属医院感染病科，江苏 南京 210029,,南京中医药大学整合医学院 江苏 南京 210023,,中科南京生命健康高等研究院，江苏 南京 211135,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,南京医科大学基础医学院病原生物学系，国家疫苗研发创新平台&卫健委抗体技术重点实验室 江苏 南京 211166,,东部战区疾病预防控制中心，江苏 南京 210002,,南京医科大学基础医学院病原生物学系，国家疫苗研发创新平台&卫健委抗体技术重点实验室 江苏 南京 211166,

关键词：大别班达病毒;mRNA疫苗;中和抗体;病毒感染

基金：南京医科大学国家疫苗研发创新平台项目；东部战区疾病预防控制中心“逸启”自主科研基金（2024YQFH04）

目的：基于mRNA疫苗策略构建大别班达病毒（Bandavirus davieense virus，DBV）疫苗，并免疫BALB/c小鼠，评价其免疫学特征。 方法：优化并合成DBV糖蛋白Gn序列，克隆至pGEM-3Zf（+）载体，质粒通过BamHⅠ酶切线性化，进行体外转录，酶法加帽和添加 A 尾制备 mRNA，瞬时转染真核 293FT 细胞，免疫印迹验证蛋白的体外表达。通过脂质纳米颗粒递送 mRNA，以低（2 μg/只）、中（5 μg/只）、高剂量（20 μg/只）每2周肌肉注射1次免疫BALB/c小鼠，ELISA测定小鼠血清抗体效价， 病毒中和实验评价小鼠血清阻断病毒感染细胞的能力。结果：制备的DBV mRNA疫苗能够进行体外转录和表达，低、中、高3 个免疫剂量均能诱导小鼠产生高水平的特异性抗体，其中高剂量免疫组可诱导稳定抗体表达至10周以上；病毒中和实验显示，免疫血清能够与病毒结合，阻止病毒感染细胞。结论：获得了能够诱导小鼠产生特异性中和抗体的DBV mRNA疫苗，为 DBV感染的预防奠定了研究基础。

来源：2024年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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