南京医科大学学报(自然科学版)

作者：魏倩影，陈欣，秦瑶，李雨潇，秦璐，张梅

单位：南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院内分泌科，江苏 南京 210029,

关键词：阿托伐他汀;铁死亡;新发糖尿病;MIN6细胞

基金：国家自然科学基金（81974103，82370828）

目的：探讨阿托伐他汀（atorvastatin，Ator）是否可诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞发生铁死亡，并探讨其可能的作用机制。方法：将MIN6细胞分为对照组、Ator组、Ator+凋亡抑制剂（Z-VAD-FMK）组、Ator+坏死抑制剂（necrostatin-1，Nec-1） 组和Ator+铁死亡抑制剂（ferrostatin-1，Fer-1）组。采用CCK-8法检测细胞活力；透射电镜观察细胞超微结构；荧光显微镜观察活性氧（reactive oxygen species，ROS）和Fe2+ 水平；酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA）检测丙二醛 （malondialdehyde，MDA）和还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量；实时荧光定量PCR法（quantitative real-time PCR，RT-qPCR） 检测凋亡基因半胱氨酸蛋白酶3（caspase-3）、坏死基因受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3（receptor-interacting serine threonine kinase 3， Ripk3）、铁死亡相关基因长链酯酰辅酶A合成酶4（acyl-coA synthetase long-chain family member 4，Acsl4）、前列腺素内过氧化物合酶2（prostaglandin-endoperoxide synthase 2，Ptgs2）和谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，Gpx4）的mRNA 表达水平；Western blot检测4-羟基壬烯醛（4-hydroxynonenal，4-HNE）和GPX4的蛋白表达水平。结果：与Ator组相比，Ator+Z-VAD-FMK 组和Ator+Fer-1组细胞存活率更高（P均＜0.01）。透射电镜下Ator组细胞可见凋亡、铁死亡和自噬相关的形态学特征。与对照组相比，Ator 组细胞 Fe2+ 相对荧光强度、MDA 水平和 ROS 相对水平均升高，GSH 含量下降；caspase-3、Acsl4、Ptgs2 的 mRNA 及 4-HNE的蛋白表达增加（P均＜0.05），GPX4的mRNA和蛋白表达减少（P ＜ 0.05）。与Ator组相比，Ator+Fer-1组Fe2+ 相对荧光强度、MDA水平和ROS相对水平均下降，GSH含量上升；Acsl4的mRNA表达减少，Gpx4的mRNA表达增加（P均＜0.05）；4-HNE 的蛋白表达减少而GPX4的蛋白表达增加，但差异无统计学意义。结论：Ator可能通过抑制甲羟戊酸途径下调GPX4表达，诱导MIN6细胞发生铁死亡。

来源：2024年第8期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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