南京医科大学学报(自然科学版)

作者：程丽，倪曼，王洁，郭爽，覃莲菊，马翔

单位：南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心，江苏 南京 210029,

关键词：氧化应激;表观遗传;环磷酰胺;谷胱甘肽;卵母细胞

基金：国家重点研发计划（2021YFC2700402）；江苏省科技厅社会发展面上项目（BE2021743）

目的：探究环磷酰胺活性代谢物4-羟基环磷酰胺（4-hydroxycyclophosphamide，4-HC）对卵母细胞质量的影响及机制。方法：将小鼠生发泡（germinal vesicle，GV）期卵丘卵母细胞复合体（cumulus-oocyte complex，COC）随机分为8组，空白对照组不做处理，溶剂对照组中添加与实验组相同浓度溶剂DMSO，实验组中分别加入终浓度为0.3、1.0、3.0、10.0、30.0、100.0 μmol/L 的4-HC，观察各组COC在体外培养后的第一极体排出率、二细胞率、囊胚率，最终确定实验组最佳浓度。检测1 μmol/L浓度下卵母细胞内活性氧水平、线粒体膜电位水平、还原型谷胱甘肽水平等以评估卵母细胞质量。RT-qPCR、免疫荧光等检测 4-HC对卵母细胞DNMT3A表达的影响。结果：随着4-HC浓度的增加，各组卵母细胞2-细胞率相当或略有下降，实验组卵母细胞受精后囊胚率随4-HC浓度增加而降低（P < 0.05）。1 μmol/L 4-HC下，小鼠卵母细胞线粒体膜电位下降、细胞内超氧化物阴离子含量上升、还原型谷胱甘肽含量下降（P均< 0.05）且囊胚形成率下降（0.809 ±0.087 vs. 0.566±0.175，P < 0.05），RT-qPCR及免疫荧光结果显示卵母细胞DNMT3A表达增加（P < 0.05）。结论：4-HC会引发卵母细胞发生氧化应激，线粒体损伤，导致其发育潜能降低，并对卵母细胞表观遗传产生影响。

来源：2024年第12期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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