国内刊号:32-1442/R
国际刊号:1007-4368
发布日期:
作者:郭爽,倪曼,程丽,严正杰,高莉,宁松,刘嘉茵
单位:南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,,南京医科大学第一附属医院生殖医学中心,生殖医学与子代健康全国重点实验室,江苏 南京 210029,
关键词:烟酸;卵母细胞;体外成熟;老龄;氧化应激
基金:国家重点研发项目(2021YFC2700404,2021YFC2700501)
目的:探究体外成熟(in vitro maturation,IVM)培养液中添加烟酸(niacin,NA)能否改善老龄小鼠卵母细胞质量及其机制。方法:以8周龄C57BL/6J小鼠为年轻对照组,40周龄小鼠为老龄组,取生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,分别添加 100、200、300 μmol/L NA,观察二细胞和囊胚形成率以确定最适作用浓度。通过第一极体排出(first polar body extrusion, PBE)率、皮质颗粒(cortical granule,CG)分布、纺锤体形态和染色体排列异常比例评估卵母细胞质量。采用免疫荧光分析线粒体膜电位和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)生成水平来评估线粒体功能;通过检测卵母细胞内和线粒体内活性氧(re- active oxygen species,ROS)水平评估氧化应激水平。采用Western blot检测氧化应激相关蛋白:沉默信息调节因子相关酶3(si- lent information regulator 3,SIRT3)、超氧化物歧化酶2(superoxide dismutase 2,SOD2)、乙酰化超氧化物歧化酶2(acetylated su- peroxide dismutase 2,Ac-SOD2)。结果:IVM培养液中NA浓度200 μmol/L时囊胚形成率最高(P < 0.05),因此选择该浓度为最适作用浓度。NA可改善老龄小鼠卵母细胞PBE率和CG分布,降低异常纺锤体率和染色体排列异常率,提高线粒体膜电位,提高ATP生成水平,降低卵母细胞和线粒体内ROS水平(P均<0.05)。Western blot结果显示添加NA培养后SIRT3和SOD2蛋白表达显著增加(P均<0.05),而Ac-SOD2蛋白表达显著下降(P < 0.05)。结论:IVM培养液中添加200 μmol/L NA可通过改善线粒体氧化应激水平以改善老龄小鼠卵母细胞质量,且可能通过SIRT3-SOD2信号通路发挥作用。
来源:2025年第8期
《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部