南京医科大学学报(自然科学版)

作者：王景泽，李倩倩，弓玄伟，杨依，侯琳，王树坤，袁增强

单位：1青岛大学基础医学院，山东 青岛 266071 ；军事医学研究院，北京 100850,,军事医学研究院，北京 100850,,军事医学研究院，北京 100850 ；河北医科大学基础医学院，河北 石家庄 050017,,军事医学研究院，北京 100850 ；山西中医药大学基础医学院，山西 晋中 030619,,1青岛大学基础医学院，山东 青岛 266071,,军事医学研究院，北京 100850,,1青岛大学基础医学院，山东 青岛 266071 ；军事医学研究院，北京 100850,

关键词：阿尔茨海默病;脑痰清;神经干细胞;细胞增殖

基金：国家自然科学基金（82230042）；山东省自然科学基金（ZR2023MH122）

目的：研究脑痰清（Nao Tan Qing，NTQ）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）小鼠中神经干细胞增殖的影响， 并探究其分子机制。方法：将五转家族性阿尔茨海默病模型小鼠（transgenic mice with five familial Alzheimer’s disease，5×FAD 小鼠）随机分为两组：AD组、AD+NTQ组，分别使用去离子水或NTQ灌胃处理；利用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法等检测海马区神经干细胞增殖情况；体外分离培养C57/BL6J小鼠胚胎神经干细胞，分别使用PBS、NTQ处理细胞，利用 CCK-8 法检测细胞增殖情况，TUNEL 检测细胞凋亡，使用免疫荧光染色检测 Y 染色体性别决定区（sex-determing region of Y chromosome，SRY）盒转录因子（2 SRY-box transcription factor 2，SOX2）阳性、5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromo-2-deoxy uridine，BrdU）阳性及双皮质素（doublecortin，DCX）阳性细胞，通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测SOX2、DCX表达。利用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测cyclin D1、p27/Kip1及GATA2的表达情况；使用cyclin D1-细胞周期依赖性蛋白激酶（cyclin-depen- dent kinase，CDK）抑制剂体外处理神经干细胞后，通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测SOX2表达水平。结果：与AD 组相比，AD+NTQ组小鼠海马区SOX2+ 细胞数量增多、SOX2 mRNA及蛋白水平显著增加；NTQ处理神经干细胞后，神经球直径显著增加，BrdU+ 、SOX2+ 及DCX+ 细胞数目增加，SOX2、DCX mRNA水平增加，SOX2蛋白水平显著增加。AD+NTQ组小鼠海马区GATA2及下游分子p27/Kip1表达下降，对cyclin D1的抑制作用减弱，使细胞发生增殖。添加cyclin D1-CDK抑制剂可减弱 NTQ所引发的SOX2、DCX表达量增加。结论：NTQ通过调控GATA2-p27/Kip1-cyclin D1信号通路，维持神经干细胞增殖，改善 AD小鼠认知障碍。

来源：2025年第10期

《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊编辑部

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